呼吸道合胞病毒感染研究现状和未来靶位课件.pptx
呼吸道合胞病毒感染研究现状和未来靶位,张国成第四军医大学西京医院儿科 2016.8,张国成 主任医师、教授、院长,博士生导师，享受国家政府特殊津贴的专家第四军医大学西京医院儿科原主任中国武警后勤学院医学院武警儿童医院院长天津市东方妇女儿童医院副院长中华医学会儿科学分会感染学组原副组长国家自然科学基金会评审专家, 国家教育部学位论文评审专家全军儿科学专业委员会顾问,原主任委员陕西省儿科学会原副主任委员陕西省预防医学儿童保健学会副主委临床儿科杂志副主编，中国当代儿科学杂志副主编发育医学电子杂志副主编负责国家自然科学基金课题3项，国家863合作课题1项，国家十一五科技支撑计划课题1项，军队、省攻关课题5项，国家临床药物验证项目6项。发表论文352篇，其中SCI论文12篇，主编国家教育部十五规范教材儿科学和军事儿科学，参编国家研究生教材儿科学、儿科感染性疾病诊疗规范和实用儿科手册等著作10部,获省、军队科技进步二等奖项，三等奖5项，国家发明专利5项。,RSV研究的五大进展,2,呼吸道合胞病毒感染研究现状和未来靶位,RSV研究的未来靶位,3,RSV研究的重要性,1,RSV研究的重要性,RSV是儿童呼吸道感染的主要病原体RSV感染与未成熟儿RSV感染导致喘息及支气管哮喘,2022/12/1,RSV-儿童呼吸道感染的主要病原,单股负链RNA病毒颗粒大小约为150nm，较副流感病毒小对乙醚敏感，无血球凝集性一个血清型，二个亚型(A、B)胞浆内增殖，形成合胞（syncytium）及包涵体,2022/12/1,RSV基因组为长约15.2kb编码11种蛋白，包括 3种跨膜包膜糖蛋白(F,G和小疏水蛋白SH) 1种基质蛋白(M) 4种核衣壳蛋白(N,P,L和M2-1) 2种非结构蛋白(NS1和NS2)为I型干扰素拮抗剂 1种RNA调节因子(M2-2)G和F为主要中和抗原，能刺激机体产生血清中和抗体和呼吸道粘膜的分泌型sIgAN，F，P，NS2和M等蛋白可诱导机体产生CD8+细胞毒性T细胞(CTLs),2022/12/1,RSV-儿童呼吸道感染的主要病原,RSV主要导致肺炎及毛细支气管炎,北京，48%的病毒性肺炎和58%的毛细支气管炎系由合胞病毒引起（19801984）广州，小儿肺炎及毛细支气管炎的31.4%由合胞病毒引起（19731986）美国，20%25%的婴幼儿肺炎和50%75%的毛细支气管炎由合胞病毒引起每年全世界至少有300万婴幼儿因为RSV病毒感染而入院，其中至少有16万人死亡。,2022/12/1,RSV是我国儿童呼吸道感染的主要病原体,刘春艳，申昆玲等.2010至2012年门诊和住院儿童急性呼吸道感染病毒病原比较分析J.中华儿科杂志, 2013, 51(4):255-259.,RSV是我国儿童呼吸道感染的主要病原体,约有 25%到 40%受感染的婴儿和儿童，会发生毛细支气管炎或肺炎 5%到 20%需要住院治疗。特别是那些需要到PICU治疗者，通常年龄小于 6 个月慢性心脏病或肺部疾病或免疫系统低下者能RSV再感染，有发生严重呼吸道病的高风险。人们对RSV不能形式持久免疫力，在一生中可反复感染,2022/12/1,RSV感染与未成熟儿,35周胎龄的早产儿RSV感染的住院率11-28% 35周胎龄出生儿比32周胎龄早产儿RSV感染更常发生呼吸暂停,系统性并发症,需要插管,机械通气,氧气补充,住ICU,及更长的住ICU时间RSV感染后2年内有更高的发病率、死亡率和或原因不明的猝死,2022/12/1,B. Paes & I. Mitchell & A. Li & K. L. Lanctt Eur J Clin Microbiol Infect Dis (2012) 31:27032711,早产儿RSV呼吸道感染,RSV与院内感染,2022/12/1,RSV感染 继发感染 (30%50%),院内感染,母传抗体不能完全地预防感染,母传抗体脐带血RSV-IgG阳性率93%，出生至1个月为89%，16个月为40%2岁及3岁体内RSV-IgG抗体阳性率达70%以上4岁直至14岁RSV-IgG阳性率为80%左右阳性母传抗体不能完全地预防感染的发生，合胞病毒肺炎在出生后任何时候都可能发生。多见于3岁以下，16个月可见较重病例，男多于女。抗体不能完全防止感染，合胞病毒的再感染极为常见，再感染发生率高达65%,2022/12/1,RSV感染导致喘息及支气管哮喘,RSV infection during the first 6 months (and especially the first 3 months) of life may lead to wheezing and asthma later in life. The exact reason why is not known, but there may be a genetic predisposition for it.,2022/12/1,Jackson DJ. et al; Am J Respir Crit Care Med. 2008 Oct 1; 178(7):667-72,OR=1.0,OR=2.6,OR=9.8,OR=10.0,*,*,*,*P0.05 vs.无+P0.05 vs. 仅RSV,3岁前喘息,6岁时的哮喘发生率%,鼻病毒(RV)或/合胞病毒感染 6岁时发生哮喘的危险增大,RSV感染诱发喘息的机制,病变以嗜中性粒细胞和淋巴细胞浸润为主病变部位主要在平滑肌发育差的细支气管，气道平滑肌收缩不是引起喘息的主要原因病毒感染 - 小气道、细支气管炎性细胞浸润、上皮细胞坏死脱落、 粘液腺增生致粘液分泌增多、管壁水肿炎性狭窄Th2反应占优势或Th2细胞因子分泌增强-暂时性气道高反应 (AHR).,Quizon A,Colin AA,Pelosi U,Rossi GA. Curr Pharm Des, 2012,18(21):3061-3085.,RSV研究的五大进展,RSV感染后机体干扰素产生异常RSV感染的疫苗进入临床验证Palivizumab免疫预防RSV感染SP应用于早产儿RSV感染的治疗重组人干扰素1b治疗RSV感染有重要作用,2022/12/1,儿童病毒感染后的干扰素产生异常,RSV感染后很少或没有干扰素的产生,Respiratory syncytial virus nonstructural proteins decrease levels of multiple members of the cellular interferon pathwaysSwedan S, Musiyenko A, Barik S.,PIV感染可抑制内源干扰素的产生,Attenuating mutations in the P/C gene of human parainfluenza virus type 1 (HPIV1) vaccine candidates abrogate the inhibition of both induction and signaling of type I interferon (IFN) by wild-type HPIV1Van Cleve W, Amaro-Carambot E, Surman SR, et al.,J Virol. 2009.,Virology. 2006.,stimulating,nuclear,NS protein,RSV,IFN,stimulating,nuclear,P/C gene,PIV,Inhibiting,Inhibiting,IFN,Palivizumab免疫预防RSV感染,RSV F蛋白单克隆抗体帕利珠单克隆抗体(palivizumab)：具有减少RSV感染导致的住院率和明显减少重症发生率的作用推荐可以将其应用于有发生重症风险的高危儿的预防，如早产儿、合并有慢性肺部疾病或者先天性心脏病患儿RSV感染高发季节开始，每公斤体重15 mg肌注，x5个月，能降低RSV感染住院率39%78%,2022/12/1,SP成为治疗RSV感染肺炎的有效手段,肺表面活性蛋白（SP）包括SP-A、SP-B、SP-C、SP-D4种蛋白,存在多个等位基因和基因多态性位点研究发现SP-A、SP-B和SP-D蛋白及其基因多态性与严重的RSV感染相关SP-D应用于早产儿RSV感染的治疗,2022/12/1,RJ Derscheid，MR AckermannVeterinary Pathology,2013,50(5):827-841 CME Saleeby，R Li，GW Somes，MK Dahmer，MW Quasney Journal of Pediatrics, 2010, 156(3):409-414,重组人干扰素1b治疗RSV感染有重要作用雾化吸入运德素治疗RSV感染，药效显著,且优于利巴韦林与中药注射剂,正常对照组,感染模型组,运德素(50 g)*,雾化吸入运德素治疗5天后，肺组织RSV病毒载量及电镜下肺组织切片观察,与腹腔注射利巴韦林、中药注射剂相比：雾化运德素，肺组织RSV病毒载量下降最为明显；雾化运德素，肺组织炎性损伤恢复最为显著。,正常对照组,感染模型组,运德素(3.125 g),运德素(12.5 g),运德素(50 g),随着药物剂量增加，肺组织病理性炎性损伤表现逐渐减轻；50 g 剂量组(人用剂量4 g/kg)小鼠肺组织炎性损伤程度趋向正常，治疗效果最佳。,气管腔内大量分泌物及炎性细胞渗出；肺泡壁明显增厚，可见大量炎性细胞浸润；毛细血管明显扩张充血。,RSV感染病理改变,用药后改善,22,重组人干扰素1b治疗RSV感染有重要作用雾化吸入运德素治疗RSV感染，药效显著,且优于利巴韦林与中药注射剂,正常对照组,RSV感染阳性组,运德素(12.33 g)腹腔,运德素(12.5 g) 雾化,运德素(25g) 雾化,利巴韦林腹腔,喜炎平腹腔,炎琥宁腹腔,23,实验结果（二）.电镜下病理学结果,图示：干扰素 25g组效果最显著；优于利巴韦林、炎琥宁、喜炎平。,运德素25g组(人用剂量2g/kg)病毒载量最低；抑制病毒效果优于利巴韦林、炎琥宁和喜炎平,24,实验结果（三）.肺组织RSV病毒载量,25,随着运德素剂量增加，免疫调节效果更加显著；50g组（相当于人用4 g/kg ）恢复至正常状态,运德素，有效恢复T淋巴细胞亚群的比例失调,26,肺、肝、肾放射计数检测(单位：CPM/g),雾化吸入肌肉注射,0.5h 2h 4h 8h 12h,0.5h 2h 4h 8h 12h,干扰素雾化吸入与肌肉注射，药动学特征不同 （运徳素雾化吸入的药代动力学研究）,雾化吸入后，运德素在肺部的浓度高，且滞留时间长，更利于发挥局部的治疗作用。,肌肉注射后，运德素主要通过肾脏代谢，在肺部浓度很低，进入肺组织慢，且滞留时间短。,27,肌肉注射,雾化吸入,研究表明，雾化吸入的运德素也会进入血液，但比肌肉注射缓慢，血药浓度平缓上升，使儿童易于耐受，不良反应更轻。,医药导报，2013,从血药浓度上看：雾化运德素入血更缓慢，应用更安全,国家注册临床I期安全试验证明：雾化（4g/kg）、肌注（2g/kg），安全性、耐受性良好,单剂量组：0.3-4.0g/kg多剂量组：每日2次，间隔6h以上，连续雾化给药7日；,前瞻性、多中心、大样本的干扰素1b（运德素）治疗RSV研究,雾化吸入重组人干扰素1b治疗小儿急性毛细支气管炎多中心研究中国实用儿科杂志. 2014,临床试验给药方案,30,病例入选：2岁（最小患儿45d），发病96h内的毛支患儿；无其他合并症,对照组 ：100例，基础用药：雾化吸入5%沙丁胺醇0.25ml和布地奈德0.5mg。 低剂量组 ：100例，基础用药+ 运德素2.0g /kg次雾化吸入 ，每日2次，疗程5-7天，观察7天。 高剂量组 ：100例，基础用药+ 运德素4.0g /kg次雾化吸入，每日2次，疗程5-7天，观察7天。,提高全部疗效指标（喘息、喘鸣音、三凹症、咳嗽、水泡音）的总改善率对主要疗效指标（喘息、喘鸣音、三凹症）的改善更明显；4g/kg 组疗效优于 2g/kg组,与常规治疗比较，提高临床症状的总改善率,*组间比较P0.05,尚云晓等中国实用儿科杂志，2014.,用药组和对照组主要症状改善每日评分均值,喘息,喘鸣音,三凹征,雾化运德素第2天，症状评分呈现明显的下降；治疗至第34天时，用药组疗效指标改善最为明显；治疗结束时，用药组的改善仍显著优于对照组。,32,与常规治疗比较，联合雾化运德素治疗毛支，第2天即可观察到显著的症状改善；第3-4天疗效更为明显,与常规治疗比较，联合雾化运德素，毛支病程显著缩短,早期用药和晚期用药均呈现出良好的改善率；早期用药优于晚期用药，并且高、低剂量组之间也有显著性差异P0.05。,发病72h前后雾化运德素治疗均有效，尽早雾化运德素治疗，疗效更突出；,34,早期用药和晚期用药的疗效比较,RSV阳性和RSV阴性的疗效比较,35,RSV阳性或RSV阴性，雾化运德素治疗组较对照组均有显著差异RSV阳性毛支患儿疗效更显著,受染严重细胞：(清除）整体水平上，免疫清除病毒,正常细胞（防御）激发抗病毒状态,已感染细胞（抑制）抑制病毒复制,干扰素1b的抗病毒作用,36,干扰素1b抗RSV的作用机制,37,撰稿专家,重组人干扰素1b在儿科的 临床应用专家共识,“共识”首次规范化干扰素1b（运德素）合理用药,“共识”首次规范化干扰素1b（运德素）合理用药,RSV感染的疫苗进入临床验证,国内现在主要集中研究RSV基因工程疫苗，包括亚单位疫苗、病毒载体疫苗、减毒沙门氏菌载体疫苗等方面，但没有进入临床研究阶段的疫苗。国外多家公司对RSV疫苗进行了研究，主要研究疫苗类型包括：减毒活疫苗、全病毒灭活疫苗、病毒样颗粒、亚单位疫苗、核酸疫苗、基因载体疫苗、组合疫苗等,2022/12/1,国外减毒活疫苗和病毒样颗粒进入临床二期,婴幼儿主动免疫用减毒活疫苗包括两类：副粘病毒载体疫苗(嵌合B/HPIV3:MEDI534带RSVF的仙台病毒载体) 减毒活RSV疫苗(MEDI559，RSVMEDIM2-2)。RSV融合糖蛋白(F)是主要的亚单位疫苗来源，融合后RSVF具有某些中和抗原决定簇。F诺瓦瓦克斯Novavax研制的RSVF纳米颗粒疫苗已经进入临床实验评估阶段，2013年做出临床2期报告，证明疫苗用于产妇的安全性和免疫原性。并免疫接种的妇女将自然将抗体转移给胎儿，可以早期被动保护婴儿免受RSV感染。葛兰素史克GlaxoSmithKline的RSV疫苗进入一期临床，该疫苗为真核CHO细胞表达的可溶性RSVF多肽,2022/12/1,RSV研究的未来靶位,RSV 感染的快速诊断和RSV感染的流行病学监测我国儿童RSV 感染 的易感基因及多态性RSV感染触发哮喘进程的相关通路RSV感染的预防疫苗Palivizumab免疫预防RSV感染不同种类SP应用于RSV感染的治疗的效应和后效应重组人干扰素1b治疗RSV感染及干预哮喘进程的作用,2022/12/1,感谢聆听Thank you！,
