胶体金免疫层析技术ppt课件.pptx

胶体金免疫层析技术,庄捷,什么叫胶体金免疫层析技术,胶体金免疫层析技术就是以胶体金为显色媒介，利用免疫学中抗原抗体能够特异性结合原理，在层析过程中完成这一反应，从而达到检测的目的。,胶体金免疫层析中的三大技术,胶体金技术： 为诊断提供肉眼可见的显色媒介膜技术 原料的固化载体，层析的动力来源免疫学技术 特异性的检测样本中需要检测物质,胶体金技术,什么叫胶体金： 胶体金是一群以胶体状态，粒径在微米级以下的悬浮于水溶液中的金的颗粒。,胶体金发展历史,古代： 用于提炼长生不老药物； 玻璃染色。近现代： 19世纪50年代由Michael Faraday第一次人工合成纯胶体金 1971年胶体金被 第一次用于电镜免疫胶体金染色法(IGS)观察沙门氏菌 1974年Romano将胶体金标记在第二抗体（马抗人IgG）上，建立了间接免疫胶体金染色法 1978年geoghega发现了胶体金标记物在光镜水平的应用,胶体金的结构：,胶体金结构： 胶体金颗粒由一个基础金核（原子金Au）及包围在外的双离子层构成，紧连在金核表面的是内层负离子（AuC12），外层离子层H+则分散在胶体间溶液中，以维持胶体金游离于溶胶间的悬液状态。,胶体金的性质,染色不同粒径，不同颜色 胶体的特性充分的溶解性，良好的流动性吸附能力在不改变蛋白性质的情况下，稳 定迅速的吸附蛋白,胶体金的应用,胶体金在电镜水平的应用胶体金在光镜水平的应用胶体金在流式细胞仪中的应用免疫印迹技术,膜技术,什么叫硝酸纤维素膜？ 以硝酸纤维素为基质，经过匀浆，滚筒铺膜，烘制成型从而制的一定孔径的硝酸纤维素膜。匀浆配方决定硝酸纤维素膜的性质。烘制速度决定硝酸纤维素膜的孔径。,硝酸纤维素膜的结构和性质,硝酸纤维素膜的性质： 微孔性：层析动力的来源 多孔性：样本流动性 蛋白吸附能力： 样本过滤：,硝酸纤维素膜的应用, 滤膜 分子杂交 核酸、蛋白转印 免疫层析,免疫学的定义,是机体识别“自身”与“非己”抗原，对自身抗原形成天然免疫耐受，对“非己”抗原产生排斥作用的一种生理功能。正常情况下，这种生理功能对机体有益，可产生抗感染、抗肿瘤等维持机体生理平衡和稳定的免疫保护作用,免疫学的发展, 经验免疫学时期 在实践中创造性地发明了人痘苗经典免疫学时期 由人体现象的观察进入了科学实验时期近代免疫学时期出现了全新的免疫学理论现代免疫学时期从分子水平对免疫系统进行研究,抗原抗体的结合,抗原抗体钥匙和锁的关系抗体能够特异性的结合抗原的活性位点。,基因工程人造蛋白的诞生及意义,基因工程指按人们意愿设计，通过改造基因或基因组而改变生物的遗传特性，从而获得新的品种货或产品。意义：可以稳定的获得人类所要的蛋白。,胶体金免疫层析技术的诞生和发展, 20世纪90年代初，第一个免疫层析产品诞生用于人绒毛膜促性腺激素(HCG)的测定。 在其后的20年中，免疫层析产品得到了快速的发展：,胶体金免疫层析技术的特点, 快速，定性 10分钟以内就可得到检测结果。 无需设备 一根检测条就能完成检测 准确、灵敏 灵敏度可以达到10-9数量级,胶体金免疫层析技术的发展, 应用范围不断扩大 疾病诊断，食品安全，药物检测，DNA检测 特异性，灵敏度不断提高 半定量，定量检测： 银染色胶体金免疫层析技术； 免疫荧光技术； 时间分辨荧光技术,The END,谢谢,