磁珠法核酸提取新篇章课件.ppt
磁珠法核酸提取的新篇章,洛阳惠尔纳米科技狄光辉13683842418Q:625006192,磁珠法核酸提取的新篇章洛阳惠尔纳米科技,核酸提取方法进展,核酸抽提是下游核酸检测、研究或产品开发的起点，所分离的核酸的质量和完整性直接影响研究或诊断结果，因此核酸抽提是分子生物学最关键的方法之一。成功的核酸分离纯化需要四个重要步骤：组织或细胞的破碎和裂解，核蛋白复合体的变性，核酸酶的灭活以及污染物的去除。,核酸提取方法进展核酸抽提是下游核酸检测、研究或产品开发的起点,传统核酸提取方法,酚-氯仿抽提法,碱抽提法,CTAB抽提法,纤维素膜层析法,传统核酸提取方法酚-氯仿抽提法碱抽提法CTAB抽提法纤维素,核酸固相抽提法,市场上大多数商业核酸抽提试剂盒采用固相抽提法。相对于传统方法，固相抽提更快速和高效。它解决了许多液-液抽提存在的诸多问题，如分离不完全等。,固相抽提方法的支持物主要有硅胶、玻璃颗粒、阴离子交换树脂、磁性颗粒。固相抽提包括细胞裂解、核酸吸附、漂洗和洗脱四个关键性的步骤。,核酸固相抽提法市场上大多数商业核酸抽提试剂盒采用固相抽提法。,提取原理,首先，基于碱裂解法使细胞膜破裂，以及组蛋白变性，释放核酸。,然后，将经裂解液处理的样本转移到固相支持物上，在结合液的帮助下靶核酸被吸附到支持物上。,蛋白质等其他化合物也可与支持物表面发生结合，但通过目的性洗涤过程可以被除掉。,最后，以TE缓冲液或蒸馏水将纯净的靶核酸从支持物上释放下来。,提取原理首先，基于碱裂解法使细胞膜破裂，以及组蛋白变性，释放,磁珠法-核酸提取新篇章,离心柱法提取DNA,离心柱法提取DNA集液管纯化柱硅胶滤膜,磁珠法提取DNA,磁珠法提取DNA,裂解使核酸游离出来,结合加入磁珠，使核酸与其结合,洗涤洗去残留杂质,洗脱将核酸从磁珠中分离出到溶液,纯化分离磁珠，得到高纯度核酸溶液,裂解结合洗涤洗脱纯化,比较（以全血为例）,离心柱法产品效果图,磁珠法产品效果图,比较（以全血为例）样本量洗脱液量OD260/280浓度离心柱,离心柱法磁珠法适用范围新鲜血液或经抗凝剂（EDTA、柠檬酸）,核酸自动化抽提系统,自动化抽提系统是可高通量地处理样品、有助于简化分离步骤的一种大型、复杂的仪器操作系统。自动化提取的优点有：减少人为工作时间，降低人力成本、增加工作者的安全性以及提高结果的可重复性和质量。,核酸自动化抽提系统自动化抽提系统是可高通量地处理样品、有助于,核酸自动提取仪,磁棒,深孔板,核酸自动提取仪磁棒深孔板,1 2 3 4 5 6,磁珠法核酸提取的核心是生物磁珠，是一种新型的功能化固体载体，其表面包被有活性基团，可与多种生物活性物质发生偶联，兼具有液体的流动性和固体磁性材料等特点。,生物磁珠的介绍,磁珠法核酸提取的核心是生物磁珠，是一种新型的功能化固体载体，,生物磁珠按功能集团分类及应用领域,1硅基磁珠此产品主要应用于核酸提取2氨基磁珠免疫检测、免疫诊,Fe3O4磁性微球,硅基（硅羟基）,氨基/羧基,生物磁珠的制备方法,Fe3O4磁性微球硅基磁珠SiO2包被氨基/羧基包被氨基/羧,植物、动物基因组DNA及细菌质粒提取试剂盒,磁珠法DNA提取试剂盒的介绍,应用：,和中科院植物研究所合作，提取百年以上植物的DNA，用于后续的分型及特定位点的分析,可用于海关、畜牧检验，检测进出口肉制品或者家禽是否携带病毒,提取质粒，用作基因工程的常用载体,植物、动物基因组DNA及细菌质粒提取试剂盒磁珠法DNA提取试,临床疾病诊断：人类的很多疾病和基因密切相关，白血病、地中海贫血、肾衰竭等都能用基因技术进行分型检测，再寻找合适的供体进行移植治疗；叶酸代谢能力基因检测；DNA亲子鉴定；胎儿性别检测动物疾病检测：布鲁菌病（brucellosis，布病），也称波状热，是布鲁菌引起的急性或慢性传染病，人畜共患病。科学研究：医学、农牧、生物相关分子生物学定量研究。应用行业： 各级各类医疗机构、疾病预防控制中心、血站、大学及研究所、兽医站等。,全血试剂盒,临床疾病诊断：人类的很多疾病和基因密切相关，白血病、地中海贫,病毒试剂盒,能够从血清、血浆等多种病毒样品中（如HBV、HPV、HCV ），高效提取和分离病毒总DNA或RNA，也可适用于组织细胞或分泌物样本中的病毒总核酸，提取产物可以直接用于下游应用，如荧光定量PCR或定量逆转录PCR等。,病毒试剂盒能够从血清、血浆等多种病毒样品中（如HBV、HPV,1. 生物磁珠具有小尺寸效应和表面效应，可高效核酸提取，满足微量生物样本核酸提取的要求。2.不使用酚、氯仿、异戊醇等有毒试剂，安全无毒，绿色环保。3.生物磁珠能够通过仪器进行自动化操作，满足数据库建设对大批量样本提取的需要，减少人为因素4.用时少，操作简单，适用于大多数生物检材。5.全自动核酸提取最大限度地减少了操作人员与检测的接触，可有效保护实验操作人员。,优点,1. 生物磁珠具有小尺寸效应和表面效应，可高效核酸提取，满足,谢谢,谢谢,
