风湿性疾病中自身抗体的意义ppt课件.ppt

风湿性疾病中自身抗体的临床意义,中国医学科学院，中国协和医科大学北京协和医院唐福林教授,风湿性疾病诊断方法症状、体征自身抗体影像学检查病理,自身抗体检测的临床意义,临床疾病的诊断和鉴别诊断判断疾病的活动性和预后进一步研究和阐明疾病的发病机制,风湿病相关自身抗体,抗核抗体谱（ANAs）类风湿关节炎相关抗体(RF, 抗CCP)抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA）自身免疫性肝病相关抗体抗磷脂抗体,ANA由来,中性粒细胞,DNP(DNA-Histone)+抗DNP+补体,均质体,LE细胞,LE细胞：并非SLE特有，PM、SD、RA、SS等结缔组织病，药物过敏，慢活肝等亦可阳性。抗DNP取代LE细胞的检测,+,抗核抗体,自身抗体：指抗自身组织、器官、细胞及其成分的抗体ANA：指抗细胞核成分（DNA，RNA，蛋白质和酶）的抗体。ANA存在一个谱ANA新概念：抗核酸（Nucleic acid）和核蛋白（Nucleoprotein）抗体的总称某些核抗原成分在核仁和胞浆内比核质内更丰富,ANA检测的意义,有助于疾病的诊断，如抗Sm是SLE标记抗体；抗ScL-70 是SD的标记抗体，抗Jo-1是PM/DM的标记抗体观察疾病活动度和治疗反应研究发病机理,抗核抗体谱（ANAs）,ANAs,抗核不溶成分抗核可溶成分（抗ENA）抗染色体DNA蛋白抗核仁抗体,抗DNA抗体 抗核小体抗体 抗组蛋白 H1,H2A, H2B, H3,H4,抗Sm,U1RNP,SSA,SSB抗Scl-70,Jo-1,PM-1抗rRNP,Sa,RA33,PCNA.,dsDNAssDNA,抗着丝点抗体（ACA),抗5sRNA,抗dsDNA抗体临床意义,SLE 血清特异性抗体 活动期SLE 80%-90%抗体滴度的消长与SLE疾病活动程度相关 可用于SLE 疾病活动期判断药物疗效观察,抗双链DNA抗体（短膜虫免疫荧光法 1:5）,抗组蛋白抗体（酶联免疫吸附法X2SD),系统性红斑狼疮 50%其他结缔组织病23-30%服异烟肼12月以上53%服苯妥因钠6月以上18%服他巴唑6个月0活动期SLE 90.2%阳性,抗H1 H2A H2B H2A-H2B H3 H4系统性红斑狼疮 + + + + + +长期服异烟肼 + + + + + +类风湿关节炎 + + + + + +SLE以IgG型抗组蛋白抗体为主，而长期服烟肼及RA病人以IgM型为主,抗组蛋白抗体（免疫印迹法）,抗ENA抗体,可提取性核抗原成分：核酸与核蛋白功能：参与细胞内的DNA的复制、转录以及蛋白的翻译合成来源：多种组织中获得，无种属差异，有组织不均一性意义：抗ENA抗体是ANAs中范围最广、最为重要的一簇抗体,几种ENA的由来及同义词,Sm：病人名：SmithRNP: u1RNP或nRNP Nuclear RibonucleoproteinSSA: RO Sjogrens syndrome ASSB: La, Ha, Sjogrens syndrome BJo-1: 病人JohnScL-70: Scleroderma,小 结,ANA是诊断弥漫性结缔组织病的重要依据。各种抗原在其分子量、结构、功能上有所不同。抗原同DNA的转录、拼接、复制、翻译等作用有关。研究ANA有利于对结缔组织病发病机理的了解ANA滴度不一定与疾病活动性相平行，正常人、尤其老年人可有低滴度ANA。感染性疾病、肿瘤也可阳性,小 结,抗双链DNA对诊断SLE高度特异，并与疾病活动有关。DNA-抗DNA免疫复合物在狼疮肾炎中起重要作用抗Sm:是SLE标记抗体，帮助前瞻性和回顾性诊断，常与nRNP抗体共存,小 结,抗nRNP在多种结缔组织病中存在，高滴度有利于MCTD的诊断。nRNP抗原与rRNP不同，前者是含尿嘧啶的核糖核蛋白，主要在核内，而rRNP是主要在胞浆内的磷酸蛋白，抗rRNP抗体与SLE 有关，尤其有精神神经症状的SLE阳性率较高,小 结,抗SSA和抗SSB与Sjogrens Syndrome相关,并可造成新生儿狼疮和先天性心脏传导阻滞抗ScL-70: SD的标记抗体抗Centromere与雷诺现象和CREST (Calcinosis, Raynauds phenomena, Esophageal dysmotility, Sclerodactyly, Telangiectasia)有关，但并非标记抗体，在干燥综合征，某些慢性肝病中亦可阳性,小 结,抗Jo-1是PM/DM的标记抗体，抗Jo-1阳性的肌炎患者，伴关节炎、“技工手”、雷诺症、肺间质变等称合成酶抗体综合征。抗组蛋白抗体与多种结缔组织病有关，有助于药物性狼疮的诊断抗核仁型抗体常与SD有关,抗磷脂抗体综合征,抗磷脂抗体综合征(Anti-phosholipid syndrome,APS)：抗磷脂抗体（ACL）阳性，反复血管内栓塞，血小板减少，习惯性流产或胎死宫内。临床上可有肺动脉高压，脑病，高凝状态等,APS诊断,主要临床表现：反复流产，静脉血栓，动脉闭塞，下肢溃疡，网状青斑，溶贫，血小板减少高水平抗磷脂抗体加一项表现，或低水平抗磷脂抗体加2项或2项以上表现则疑似APS,磷脂抗体（Phospholipid antibody）,多见于SLE（70%），SS、白塞病、自身免疫性血小板减少、真性红细胞增多、免疫性血管炎、习惯性流产、恶性肿瘤、多发性硬化、传染性疾病、肾上腺出血和Addison病均可阳性,合并SLE，SS，CTD，肿瘤，药物，感染等称为继发性APS诊断APS应排除血流阻滞，血凝等其他因素，排除肾病，糖尿病，高血脂，肿瘤及血管炎；流产原因可为染色体异常，内分泌，药物，感染等因素,抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA),靶抗原：中性蛋白酶3（PR3），髓过氧化物酶（MPO），杀菌/通透性增高蛋白（BPI），丝氨酸蛋白酶，人白细胞弹性蛋白酶（HLE），乳铁蛋白（LF），组织蛋白酶G，葡萄糖醛酸酶，溶菌酶,抗中性粒细胞胞浆抗体（Anti-Neutrophil Cytoplasmic Antibody,ANCA）,cANCA(PR3蛋白酶)中性粒细胞胞浆内荧光染色，其抗原是中性粒细胞颗粒内的和单核细胞溶酶体的丝氨酸蛋白酶，此种抗体主要与Wegeners肉芽肿相关，且与疾病活动性相平行，结节性多动脉炎也可阳性。,抗中性粒细胞胞浆抗体（Anti-Neutrophil Cytoplasmic Antibody,ANCA）,ANCA（MPO）指核周染色，并非周边型核抗体。其抗原是胞浆内髓过氧化物酶，弹力蛋白酶及某些成分，此种抗体与特发性新月体肾小球肾炎相关，且与疾病活动度相平行。显微镜下多动脉炎，结节性多动脉炎也与之有关,下列临床表现拟行ANCA检测肾小球肾炎，尤其是急进性肾小球肾炎肺出血，尤其是肺肾综合征皮肤血管炎，尤其是伴发全身表现多发性肺结节上呼吸道慢性破坏性疾病长期鼻窦炎或中耳炎声门下气管狭窄多发性单神经炎或外周神经病变眼眶后肿物,类风湿关节炎相关抗体,RFAPFAKA抗Sa抗CCP,类风湿因子（Rheumatoid Factor）,抗人或动物的IgG的FC片段抗体。其本身是免疫球蛋白，因此，RF有IgG、IgM、IgA型等。RF无种族和种属特异性与DNP及半抗原（二硝基苯）有交叉反应。7S IgM(IgG)-RF主要参与关节外症状的免疫复合物形成，且与疾病活动性有关,类风湿因子（Rheumatoid Factor）,RF由外周淋巴结、关节滑膜、扁桃体淋巴滤泡和骨髓产生。（CD5+ B淋巴细胞是产生IgM-RF主要细胞。）,RF的临床意义,是诊断RA的标准之一，不是唯一标准，并非RA特有作为血清阴性脊柱关节病区分标准正常人2%阳性，老年人可达5%阳性RA 50-90%、SS 75-95%、MCTD 50-60%、IgA肾病25-40%、SLE 15-30%、SSc 20-30%、DM/PM 5-10%,RF的临床意义,病毒性肝炎、慢性感染性疾病、结核、SBE、肿瘤、高球蛋白血症、寄生虫感染、肝硬化、结节病、弥漫肺间质纤维化等均可阳性。在RA病后半年才产生。有关节外表现者，滴度高。持续高滴度RF预示疾病严重，预后差。,RF的诊断特异性,高滴度2次或多次阳性多种方法检测均阳性与人或动物IgG分子反应，但不与其它相关抗原反应除IgM-RF外，还有IgG-RF和IgA-RF特异性随上述因素增多而增强,抗环瓜氨酸肽（Cyclic citrullinated peptide CCP）抗体,1. ELISA：人工合成的“环瓜氨酸肽”为抗 原。2. 诊断RA的敏感性：46.6%，特异性：96.6%。3. 与APF、AKA相关（CCP是filaggrin的一段肽链）， 但不完全重叠。4. 与HLA-DR4相关，提示抗CCP（+）病情重，骨破坏明显。,自身免疫性肝病,自身免疫性肝炎(Autoimmune hepatitis, AIH)原发性胆汁性肝硬化（Primary biliary cirrhosis, PBC）原发性硬化性胆管炎（Primary sclerosing cholangitis,PSC）,AIH相关抗体,I 型 ANA SMA (抗平滑肌抗体)II 型 抗LKM1 (抗肝肾微粒体抗体1)III型 抗SLA (可溶性肝脏抗原),自身免疫性肝病,自身免疫性肝炎(Autoimmune hepatitis, AIH)原发性胆汁性肝硬化（Primary biliary cirrhosis, PBC）原发性硬化性胆管炎（Primary sclerosing cholangitis,PSC）,AMA亚型抗体种类及其疾病相关性,自身免疫性肝病,自身免疫性肝炎(Autoimmune hepatitis, AIH)原发性胆汁性肝硬化（Primary biliary cirrhosis, PBC）原发性硬化性胆管炎（Primary sclerosing cholangitis,PSC）,PSC(Primary sclerosing cholangitis),Ig（IgM）AMA（-）ANCA(+)、IgGANCA、IgG1ANCA,自身抗体进展,北京协和医院研究了抗内皮细胞抗体（AECA）对系统性血管炎的诊断作用,AECA主要见于免疫性血管炎疾病，有潜在致病性，该抗体对血管炎的诊断和判断疾病的活动性、预后有一定意义。,以永生内皮细胞株（Eaby 926）提取抗原，由免疫印迹法检测AECA，并以双向电泳、免疫印迹和质谱分析发现AECA的共同靶抗原主要是分子量为47000内皮细胞蛋白，其成分为-烯醇化酶,AECA在不同疾病中的阳性率,注：与RA和正常人相比，*P0.01,抗M3受体抗体在不同风湿性疾病的阳性率,