果蝇的杂交实验课件.ppt
果蝇的杂交实验,生物技术、生物科学、生态专业学时数：6学时 制作人：邰丽华,果蝇的杂交实验生物技术、生物科学、生态专业,实验四、果蝇的杂交实验实验内容： （一）果蝇的单因子杂交实验 （二）果蝇的二对因子杂交实验 （三）果蝇的连锁互换杂交实验 （四）果蝇的伴性遗传杂交实验 （五）果蝇的三点测交实验,实验四、果蝇的杂交实验,实验目的： 1、通过实验掌握果蝇的杂交实验方法。 2、验证和加深理解遗传定律的原理： 分离定律 自由组合定律 连锁互换定律 伴性遗传规律 绘制遗传图的原理。 3、记录实验结果，掌握统计处理的方法及 求重组值的方法、绘制遗传图的方法。,实验目的：,实验原理： 分离定律：同源染色体上等位基因的分离 自由组合定律：非同源染色体上非等位基因的 自由组合 连锁互换定律：同源染色体上非等位基因间交换 重组 伴性遗传：性 染色体上的基因遗传行为与性别 有关（F2中正反交结果不同） 三点测交：连锁基因间的距离与重组值的大小 有关，则根据重组值可确定基因在 染色体上的位置和排列顺序，从而 作出连锁图,实验原理：,实验材料、用具及试剂： *黑腹果蝇三隐性突变型(w m sn3) X 黑腹果蝇黑檀体突变型(e) *双筒解剖镜、放大镜、培养瓶、麻醉瓶、 死蝇瓶、白瓷板、毛笔、镊子、烘干箱、 培养箱 *乙醚、70%乙醇实验说明： 1、单因子实验: P 长翅 + + 残翅 vg vg F1 长翅 + vg F2 1 + + : 2 + vg : 1 vg vg(长:残=3:1),实验材料、用具及试剂：,2、二对因子实验： P 黑檀体 + + ee vg vg + + 残翅 F1 野生型+e vg + F2 野生型 ：黑檀体 ：残翅 ：黑檀体、残翅 9 ： 3 ： 3 ： 1 3、连锁互换实验： P 黑体 + b/ + b vg + /vg + 残翅 F1 野生型 + b/ vg + b vg/ b vg 野生型 ：黑体 ：残翅 ：黑体、残翅,2、二对因子实验：,亲组型重组型 交换重组 4、伴性遗传实验： 正交： P 红眼 X+X+ 白眼XwY F1 红眼 X+Xw 、 X+Y （、 ） F2 X+X+ :X+Xw :X+Y : XwY 红眼：白眼 = 3 ：1 雌性：雄性 = 1 ：1,亲组型重组型 交换,反交：P 白眼XwXw 红眼 X+Y F1 红眼 X+Xw 、 白眼Xw Y F2 X+ Xw :Xw Xw :X+Y : XwY 红眼：白眼 = 1 ：1 雌性：雄性 = 1 ：1 正反交结果不同,反交：P 白眼XwXw 红眼 X+,5、三点测验 P 三隐性 w m sn3 + + + 野生型 w m sn3 F1 w m sn3 w m sn3 + + + 测交后代： w m sn3 + m sn3 w + sn3 w m + + + + w + + + m + + + sn3 根据测交后代8种表现型的相对频率可计算重组值，并确定基因排列顺序。,5、三点测验,6、新的实验设计 选用适当的果蝇突变品系作亲本，在一次杂交实 验中包括并完成相关的5个果蝇杂交实验 正交： P 黑檀体 e + + + + w m sn3三隐性 e + + + + F1 + w m sn3 e + + + e + + + + F2,6、新的实验设计,反交： P 三隐性 + w m sn3 e + + +黑檀体 + w m sn3 e F1 + w m sn3 + w m sn3 e + + + e F2 在F1的杂交中： 对e基因（） F1自交 对w m sn3 （X）基因 F1测交,反交：,实验步骤： 1、分别培养三隐性和黑檀体果蝇，从子代中分 别挑选出处女蝇和雄果蝇。 2、三隐性和黑檀体果蝇进行正反交，23培养。 3、78天后移去亲本，待F1成蝇出来后观察记 录F1的性状。正反交产生的F1不必挑处女蝇。 4、将F1雌雄果蝇进行自交（反交实际上是测交） ，把20 30对雌雄果蝇放到新的培养瓶中（ 正反交各5瓶，每瓶5 6对)，23培养。 5、78天后移去F1，待F2成蝇出来后观察性 状，并记录统计数量（观察的性状为：眼色、 翅形、刚毛、体色），连续统计8 10天。 要求至少各统计250只果蝇。,实验步骤：,实验结果的统计处理： 待F1或F2成蝇开始出现后，检查其性状，将结果 填入表1和表2。 表1 F1表型观察统计表 表型 正交后代数目 反交后代数目 体、眼、刚毛、翅 合计 合计 灰、红、直、 长 灰、白、焦、 小,实验结果的统计处理：,表 F2表型观察统计表表型 正交F2数目反交F2数目（测交后代） 合计 合计w sn m sn m w w m sn w sn m,表 F2表型观察统计表,表 F2表型观察统计表（续表）表型 正交F2数目反交F2数目（测交后代） 合计 合计 9e10e w sn m11e sn m12e w 13e w m14e sn 15e w sn 16e m,表 F2表型观察统计表（续表）,实验结果的分析： 1、分离规律的验证 考虑常染色体上一对等位基因（+ e）所控 制的灰体和黑檀体这一对相对性状的杂交结果。 F1的观察结果：体色灰体/黑檀体 F2的观察结果： 表3 F2表型观察统计表 表 型 正交后代数目 反交后代数目 体 色 合计 合计 灰 体 黑檀体 F2的表型产生3：1的分离 对实验结果（正反交）进行2测验,实验结果的分析：,2、自由组合规律的验证 只考虑正交实验中体色（ee + +)和翅形（+ + mm ) 两对相对性状的杂交结果。 F1的观察结果：体色和翅形 F2的观察结果： 表4 F2表型观察统计表 表 型 正 交 后 代 数 目 体色、翅形 合 计 灰体、长翅 黑檀体、长翅 灰体、小翅 黑檀体、小翅 F2产生9：3：3：1的自由组合表型比 对实验结果（正交）进行2测验,2、自由组合规律的验证,3、连锁互换规律的验证 只考虑反交实验中复眼颜色（ + / w )和翅形（ + / m) 两对相对性状的杂交结果。控制这两对性状的基 因均在X染色体上，是连锁遗传。 F1的观察结果：复眼颜色和翅形 表5 F1表型观察统计表 表 型 反 交 后 代 数 目 复眼颜色、翅形 合 计 红眼、长翅 白眼、小翅,3、连锁互换规律的验证,F2的观察结果： 表6 F2表型观察统计表 表 型 反 交 后 代 数 目 复眼颜色、翅形 合 计 红眼、长翅 红眼、小翅 白眼、长翅 白眼、小翅 F2中：亲组合50% 重组合50% 用重组值公式计算w和m两个基因间的重组值和图距,F2的观察结果：,4、伴性遗传规律的验证 考虑X染色体上一对等位基因（+ w）所控制 的红眼和白眼这一对相对性状的杂交结果。 F1的观察结果：复眼的颜色 表7 F1表型观察统计表 表 型 正交后代数目 反交后代数目 复眼颜色 合计 合计 红 眼 白 眼 F1中正反交的结果不同,4、伴性遗传规律的验证,F2的观察结果： 表8 F2表型观察统计表 表 型 正交后代数目 反交后代数目 复眼颜色 合计 合计 红 眼 白 眼 F2中： 正交 红眼：白眼=3：1 （都是红眼， 一半红眼、一半白眼） 反交 红：红：白：白 =1：1：1：1 对实验结果（正反交）进行2测验,F2的观察结果：,5、三点测交分析 考虑反交实验中复眼颜色（ + / w )、翅形（ + / m) 和焦刚毛（+/sn）三对相对性状的杂交结果。控 制这三对性状的基因均在X染色体上，是连锁遗传。 F1的观察结果：复眼颜色、翅形和刚毛 表9 F1表型观察统计表 表 型 反 交 后 代 数 目 眼、翅、刚毛 合 计 红眼、长翅、直刚毛 白眼、小翅、焦刚毛 反交中F1的自交就是测交,5、三点测交分析,F2的观察结果： 表10 三点测交的F2表型观察统计表 表 型 反 交 后 代 数 目 眼、翅、刚毛 合 计 w sn m w sn m sn w m m w sn 判断w、m和sn三个基因的排列顺序，计算三个基因间的重组值和图距，用并发率测定干涉的大小,F2的观察结果：,作业： 按实验指导的要求，在表格中填写实验结果， 统计各种实验数据，进行2测验、计算重组值、作 图。 分离规律进行2测验（正反交） 自由组合规律进行2测验（正交） 连锁互换规律计算重组值、作图（反交） 伴性遗传规律进行2测验（正反交） 三点测交计算重组值、并发率、作图（反交）,加油，同学们！,作业：加油，同学们！,
