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    培养液中酵母菌种群数量的变化(内容全)ppt课件.ppt

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    培养液中酵母菌种群数量的变化(内容全)ppt课件.ppt

    一、血球计数板,1、血球计数板的结构,血球计数板是一种专门用于计算较大单细胞微生物数量的仪器,由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的玻片中有四条下凹的槽,构成三个平台。中间的平台较宽,其中间又被一短横槽隔为两半,每半边上面刻有一个方格网。,大方格,中方格,小方格,方格网上刻有9个大方格,其中只有中间的一个大方格为计数室,供微生物计数用。,大方格的长和宽各为1mm,深度为0.1mm,即1mm1mm0.1mm,其容积为0.1mm3; 大方格的长和宽各为2mm,深度为0.1mm,即2mm2mm0.1mm,其容积为0.4mm3,计数室通常也有两种规格,1625型: 即大方格内分为16中格,每一中格又分为25小格,2516型: 即大方格内分为25中格,每一中格又分为16小格。,不管计数室是哪一种构造,其每一大方格都是由1625=2516=400个小方格组成。,2、计数,1625型: 一般取四角的四个中方格(100个小方格)计数,2516型: 一般计数四个角和中央的五个中方格(80个小方格)的细胞数。,3、计算,以1mm1mm0.1mm型为例,计数室容积为0.1mm3,则每个小方格的容积为1/4000 mm3 。,100个小方格细胞总数/ 100 40010000稀释倍数,酵母细胞个数1mL =,80个小方格细胞总数/ 80 40010000稀释倍数,例1 通常用血球计数板对培养液中酵母菌进行计数,若计数室为1mm1mm0.1mm方格,由400个小方格组成。若多次重复计数后,算得每个小方格中平均有5个酵母菌,则10mL该培养液中酵母菌总数有 个。,2108,例2 检测员将1 mL水样稀释10倍后,用抽样检测的方法检测每毫升蓝藻的数量;将盖玻片放在计数室上,用吸管吸取少许培养液使其自行渗入计数室,并用滤纸吸去多余液体。已知每个计数室由2516400个小格组成,容纳液体的总体积为01 mm3。,现观察到图中该计数室所示a、b、c、d、e 5个中格80个小格内共有蓝藻n个,则上述水样中约有蓝藻 个mL。,5n105,探究,培养液中酵母菌种群数量的变化,一般步骤:(1)提出问题:培养液中酵母菌种群是怎样随时间变化的?(2)作出假设: 。(3)讨论探究思路:问题(4)制定计划:(5)实施计划:(6)分析结果,得出结论:(7)表达和交流:(8)进一步探究:,怎样进行酵母菌的计数?,对一支试管中的培养液(可定为10ml)中的酵母菌逐个计数是非常困难的,可以采用抽样检测的方法:先将盖玻片放在计数室上,用吸管吸取培养液,滴于盖玻片边缘,让培养液自行渗入,多余培养液用滤纸吸去,稍待片刻,待酵母菌细胞全部沉降到计数室底部,将计数板放在载物台的中央,计数一个小方格内的酵母菌数量,再以此为根据,估算计算中的酵母菌总数,盖玻片下,培养液厚度为0.1mm,可算出10ml培养液中酵母菌总数的公式:4107x(x为小方格内酵母菌数),从试管中吸出培养液进行计数之前,建议你将试管轻轻振荡几次。这是为什么?本探究需要设置对照吗?如果需要请讨论对照组应怎样设计和操作;如果不需要,请说明理由。需要做重复实验吗?,目的是使培养液中的酵母菌均匀分布,以保证估算的准确性,减少误差。,不需要,本实验旨在探究培养液中酵母菌在一定条件下的种群数量变化,只要分组实验,获得平均数值即可。,不用重复,只要分组实验获得平均值即可。重复是为了使结果更准确。本实验酵母菌种群数量足够多,样本足够大。其数据是80-100个小方格的平均值,足够精确。,5、怎样记录结果?记录表怎样设计?如果一个小方格内酵母菌过多,难以计数,应采取怎样的措施?,摇匀试管取1mL酵母菌培养液稀释几倍后,再用血球计数板计数,只计数相邻两边及其顶角的酵母菌数。,7 对于压在小方格界线上的酵母菌,应当怎样计数?,探究,培养液中酵母菌种群数量的变化,一般步骤:(1)提出问题:培养液中酵母菌种群是怎样随时间变化的?(2)作出假设: 。(3)讨论探究思路: (4)制定计划:(5)实施计划:(6)分析结果,得出结论:(7)表达和交流:(8)进一步探究:,探究培养液中酵母菌种群数量的变化,单细胞真核生物生长周期短,增殖速度快还可以用酵母菌作为实验材料研究 探究酵母菌的呼吸方式 判断细胞的死活(探究膜的透性),种群数量的变化包括增长、波动、稳定、下降等 “S”型曲线有一个K值,即环境容纳量。种群数量的增长也受到许多环境因素(如温度、培养液的pH、培养液的养分种类和浓度、代谢产物等)的影响。,培养液中酵母菌种群数量与时间的变化关系,实验原理: 种群的数量变化有一定的规律。在理想条件下,种群呈“J”型增长,在有限的环境下,种群呈“S”型增长。 酵母菌生长周期短,增殖速度快,在实验室条件下,用液体培养基培养酵母菌,可以观察酵母菌种群数量随时间变化的情况。,血球计数板是一种专门用于计算较大单细胞微生物的一种仪器。计数时,常采用样方法。,对于压在小方格界线上的酵母菌应取相邻两边及顶角计数。,第 1 天,第 4 天,第 6 天,第 7 天,死亡,活菌数,在计数前,还应有哪些步骤?需注意些什么?,培养液配制灭菌接种培养,无菌操作,培养条件,针对“培养液中酵母菌种群数量的动态变化”,有人提出了新的问题,某同学按下表完成了有关实验。,温度、营养物质对酵母菌生长的影响,培养液中酵母菌种群数量的变化,探究:,探究过程,1提出问题:2作出假设:3设计实验:4进行实验:5分析结果和 表达交流:6得出结论:,培养液中酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的?,酵母菌在开始一段时间呈“J”型增长,随着时间的推移,由于资源和空间有限,呈“S”型增长。,连续培养5天,每天用显微镜和血球计数板计数出酵母菌种群密度,各小组汇报实验结果,结合前4天的结果,画出酵母种群增长的曲线图并进行分析。,酵母菌在开始一段时间呈“J”型增长,但随着时间的推移,由于资源和空间有限,将呈“S”型增长,并最终将全部死亡。,3设计实验:,将10mL无菌马铃薯培养液或肉汤培养液加入试管中;将酵母菌接种入试管中的培养液中混合均匀;将试管在28条件下连续培养5d;每天取样计数酵母菌数量;分析结果,得出结论。,是否设置对照组和多组重复实验?,为什么要连续培养?,如何取样计数?记录表怎样设计?计数时有哪些注意事项?,计数室,计数室(中间大方格)的长和宽各为1mm,深度为0.1mm,其体积为_mm3 ,合_mL。,1mm,0.1,110-4,血球计数板:一种专门计数较大单细胞微生物的仪器,计数室,计数室分为25中格(双线边),每一中格又分为16小格,计数室是由_个小格组成,2516=400,如何计数?,五点取样法,样方法,每mL培养液中酵母菌数量=,=A (平均每个中格酵母细胞数)25104,稀释倍数,A1,A2,A5,A3,A4,酵母菌数量变化记录表,计数时有哪些注意事项?,从试管中吸出培养液进行计数之前,要将试管轻轻震荡几次; 如果酵母菌浓度过大,应先稀释。,对于压在中格界线上的酵母菌,一般只取相邻两边及夹角计数;,对于已经出芽的酵母菌,芽体达到母细胞大小一半时,即可作为两个菌体计算;已死亡的酵母菌不计数。,每个样品一般计数三次,取其平均值。,培养液中酵母菌种群数量的变化,死亡,

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